新新肝康片的质量标准研究
作者：谢景文 李茂星 马慧萍 葛欣 何晓英 任俊 李琳 谢华
单位：兰州军区总医院药局， 兰州市 730050
关键词：新新肝康片；质量标准；薄层扫描法；五味子甲素；丹参酮ⅡA
中国药房000309
摘要：目的：建立新新肝康片的质量标准。方法：采用TCL法对五味子、丹参、板蓝根进行定性鉴别，用薄层扫描法分别测定五味子甲素、丹参酮ⅡA的含量。结果：五味子甲素、丹参酮ⅡA的含量分别为0.602mg/g、0.376mg/g，回收率为96.89%、96.68%。结论：TCL法作为该制剂质量控制方法，简单快速、稳定可靠。
中图分类号：R927.1 文献标识码：B 文章编号：1001-0408(2000)03-0116-02
, http://www.100md.com
Studies on Quality Standards for Xinxin Gankang Tablet
XIE Jingwen，LI Maoxing，MA Huiping，GE Xin，HE Xiaoying，REN Jun，LI Lin，XIE Hua
(Department of Pharmacy,Lanzhou General Hospital,Lanzhou Military Command,PLA,Lanzhou 730050)
ABSTRACT：OBJECTIVE：To set up the quality standards for Xinxin Gankang tablet(XXGK).METHODS：Fructus schisandrae and radix salvia miltiorrhizae were identified by TCL method.The contents of deoxyschizandrin and anshinone ⅡA in XXGK ere determined by thin-layer chromatography.RESULTS：The contents of deoxyschizandrin and anshinone ⅡA were 0.602mg/g,0.376mg/g respectively and the recovery rates were 96.89% and 96.65% respectively.CONCLUSION：The methods in this article are stable and reliable,simple and rapid,which can be used as the index of quality control.
, 百拇医药
KEY WORDS：Xinxin Gankang tablet;quality standard;thin-layer chromatography;deoxyschizandrin;anshinone ⅡA
新新肝康片(XXGK)主要用于治疗乙、丙型肝炎，药理实验[1，2]及临床疗效观察证明，具有扶正固本、健脾益气、抗病毒、强肝益肝、活血化瘀、补肾、降脂等作用。该制剂为丹参、五味子、板蓝根等多味中药经提取制成的浸膏片，在我院临床应用多年，疗效确切。为了保证制剂质量，笔者试用TCL法作为该制剂的质量控制方法，现报道如下：
1 仪器与药物
CS-930型薄层扫描仪(日本岛津)；硅胶G及GF254板(青岛海洋化工厂)；微量定量点样管(美国)；五味子甲素、丹参酮ⅡA、靛玉红标准品(购自中国药品生物制品检定所)；新新肝康片(兰州军区总医院自制)；试剂均为分析纯。
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2 定性鉴别
2.1 对照品溶液的制备
精密称取五味子甲素5.10mg、丹参酮ⅡA10.40mg、靛玉红5.31mg，置5ml容量瓶中，以氯仿溶解并稀释至刻度，浓度分别为1.02mg/ml、2.08mg/ml、1.06mg/ml，分别制备五味子、丹参、板蓝根药材对照溶液。
2.2 供试品溶液的制备
样品研细，过60目筛，精密称取10g，加氯仿50ml，加热回流40min，过滤，浓缩至10ml，分别制备未加五味子、丹参、板蓝根药材的阴性对照样品溶液，制法同样品制备。
2.3 层析条件及结果
五味子药材、五味子甲素、样品、未加五味子的阴性对照样品溶液分别点样于硅胶GF254板(10×20cm)，以石油醚∶乙酸乙酯∶甲酸(15∶5∶1)展开，取出，晾干。在254nm紫外灯下观察，供试品色谱中在与五味子甲素色谱相应的位置上有相同的荧光斑点，而阴性对照样品溶液中无相应斑点，见图1。
, 百拇医药
图1 五味子甲素的薄层色谱图
板蓝根药材、靛玉红、样品、未加板蓝根的阴性对照样品溶液分别点样，层析条件同五味子。在自然光下，供试品色谱中在与靛玉红色谱相应的位置上有相同的红色斑点，而阴性对照样品溶液中无相应斑点，见图2。
图2 靛玉红的薄层色谱图
丹参药材、丹参酮ⅡA、样品、未加丹参的阴性对照样品溶液分别点样于硅胶G板(10×20cm)，以苯∶乙酸乙酯(19∶1)展开[3]，取出，晾干。自然光下供试品色谱中在与丹参酮ⅡA色谱相应的位置上有相同的红色斑点，而阴性对照样品溶液中无相应斑点，见图3。
图3 丹参酮ⅡA的薄层色谱图
3 样品中五味子甲素和丹素酮ⅡA的含量测定
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3.1 扫描波长及有关仪器参数的确定
五味子甲素：测定波长260nm，参比波长350nm，反射法直线扫描[4]。
丹参酮ⅡA：测定波长275nm，参比波长350nm，反射法矩齿扫描[5]。
3.2 线性范围试验
五味子甲素：用定量毛细管准确吸取对照液1、2、3、4、5μl点于同一硅胶GF254板上，按五味子甲素层析条件展开并进行扫描测定。结果对照品在1μg～5μg内与积分值呈直线关系，γ=0.9 995，回归方程：Y=1 072.9X+477.5。
丹参酮ⅡA：用定量毛细管准确吸取对照液1、2、3、4、5μl点于同一硅胶G板上，按丹参酮ⅡA层板条件展开并进行扫描测定。结果对照品在2μg～10μg内与积分值呈直线关系，γ=0.9 994，回归方程：Y=2 504.5X—214.7。
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3.3 稳定性实验
准确吸取五味子甲素、丹参酮ⅡA对照液各3μl(n=5)，分别点于薄层板上，展开后按0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0h分别进行薄层扫描测定，斑点面积积分值在3h内稳定，结果见表1。
表1 稳定性试验 时间(h)
0
0.5
1
1.5
2
3
RSD(%)
, 百拇医药 五味子甲素
1
3894
3931
3968
3988
3971
3921
0.91
2
3828
3837
3877
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3941
3903
3962
1.40
3
3934
3892
3872
3833
3876
3871
0.85
4
, 百拇医药
3966
4012
4083
3981
3984
3927
1.39
5
3862
3823
3798
3771
3833
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3853
0.89
丹参酮ⅡA
1
7372
7222
7260
7321
7194
7099
1.33
2
7337
, 百拇医药
7292
7312
7192
7173
7153
1.10
3
7202
7228
7135
7076
7098
7195
, 百拇医药
0.86
4
7347
7239
7189
7270
7268
7284
0.72
5
7323
7301
7264
, 百拇医药
7189
7138
7165
1.06
3.4 精密度试验
准确吸取五味子甲素对照液3μl、丹参酮ⅡA对照液4μl，分别点于薄层板上，展开后进行薄层扫描测定。峰面积积分值变异系数，五味子甲素RSD=1.14%(n=5)，丹参酮ⅡARSD=0.42%(n=5)。
3.5 样品测定
五味子甲素：取样品细粉约10g，精密称定，按供试品溶液的制备方法配制，准确吸取样品溶液6μl，点于硅胶GF254板上，同标准曲线操作测定含量，结果见表2。表2 含量测定 批号
, 百拇医药
五味子甲素(mg/g)
丹参酮ⅡA(mg/g)
980211
0.611
0.376
980527
0.592
0.373
980806
0.602
0.379
990118
, 百拇医药
0.595
0.380
990421
0.609
0.371
平均值
(0.602±1.39)%
(0.376±1.02)%
丹参酮ⅡA：准确吸取上述样品溶液20μl，点于硅胶G板上，同标准曲线操作测定含量，结果见表2。
3.6 重复性试验
取批号为990421样品，一式5份，按样品测定方法测定五味子甲素和丹参酮ⅡA的含量，结果平均含量分别为0.609mg/g、0.371mg/g，RSD分别为1.21%、1.13%。
, 百拇医药
3.7 回收率试验
采用加样回收实验，准确吸取已知含量的供试品溶液适量，分别加入定量的五味子甲素、丹参酮ⅡA对照品溶液，按样品含量测定方法测定，计算回收率，结果见表3。表3 回收率试验(n=6) 编号
五味子甲素
丹参酮ⅡA
加入量(μg)
实测量(μg)
回收率(%)
加入量(μg)
实测量(μg)
回收率(%)
, 百拇医药
1
2.04
1.99
97.55
2.08
2.04
98.09
2
2.04
1.96
96.08
2.08
2.02
, 百拇医药
97.11
3
3.06
2.92
95.42
4.16
4.06
97.60
4
3.06
3.02
98.69
4.16
, 百拇医药
3.98
95.67
5
3.06
2.96
96.73
4.16
3.95
94.95
平均值
(96.89±1.32)%
(96.68±1.37)%
4 讨论
, 百拇医药
新新肝康片药味较多，经多次试验，表明本文的展开系统分离度好，其它组分无干扰。
在提取样品过程中，笔者曾选用超声波处理、索氏提取器提取和回流提取3种方法进行比较。超声波处理所测得的含量低，索氏提取器由于本品含量少、取样量大，提取效果也不好，所以回流提取属优选。笔者同时还比较了氯仿、乙醇、70%乙醇、甲醇4种溶剂对样品的提取率，发现氯仿提取效果最好，提取样品分离更容易。
本实验根据五味子甲素与丹参酮ⅡA薄层层析斑点的特性，采用双波长薄层锯齿与线性扫描法分别测定其含量，方法快捷、简便、重现性好，可作为该制剂的质量控制标准。
参考文献：
1.谢景文，葛 欣，何晓英，等.新新肝康片对四氯化碳、D-氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤的研究[J].中国药房，1996，5：204.
, http://www.100md.com
2.谢景文，葛 欣，何晓英，等.新新肝康片在动物体内的活血实验[J].中国药房，1999，4：156.
3.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部) [S].1995年 版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995：862.
4.李慧英，赵余庆，徐 晶，等.五味子口服液质量标准研究
[J].中成药，1994，10：15.
5.刘建民.薄层扫描法测定健脑益智冲剂中丹参酮ⅡA的 含量[J].中国中药杂志，1995，2：101.
(收稿日期：1999-12-01 修回日期：2000-02-28), 百拇医药
单位：兰州军区总医院药局， 兰州市 730050
关键词：新新肝康片；质量标准；薄层扫描法；五味子甲素；丹参酮ⅡA
中国药房000309
摘要：目的：建立新新肝康片的质量标准。方法：采用TCL法对五味子、丹参、板蓝根进行定性鉴别，用薄层扫描法分别测定五味子甲素、丹参酮ⅡA的含量。结果：五味子甲素、丹参酮ⅡA的含量分别为0.602mg/g、0.376mg/g，回收率为96.89%、96.68%。结论：TCL法作为该制剂质量控制方法，简单快速、稳定可靠。
中图分类号：R927.1 文献标识码：B 文章编号：1001-0408(2000)03-0116-02
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Studies on Quality Standards for Xinxin Gankang Tablet
XIE Jingwen，LI Maoxing，MA Huiping，GE Xin，HE Xiaoying，REN Jun，LI Lin，XIE Hua
(Department of Pharmacy,Lanzhou General Hospital,Lanzhou Military Command,PLA,Lanzhou 730050)
ABSTRACT：OBJECTIVE：To set up the quality standards for Xinxin Gankang tablet(XXGK).METHODS：Fructus schisandrae and radix salvia miltiorrhizae were identified by TCL method.The contents of deoxyschizandrin and anshinone ⅡA in XXGK ere determined by thin-layer chromatography.RESULTS：The contents of deoxyschizandrin and anshinone ⅡA were 0.602mg/g,0.376mg/g respectively and the recovery rates were 96.89% and 96.65% respectively.CONCLUSION：The methods in this article are stable and reliable,simple and rapid,which can be used as the index of quality control.
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KEY WORDS：Xinxin Gankang tablet;quality standard;thin-layer chromatography;deoxyschizandrin;anshinone ⅡA
新新肝康片(XXGK)主要用于治疗乙、丙型肝炎，药理实验[1，2]及临床疗效观察证明，具有扶正固本、健脾益气、抗病毒、强肝益肝、活血化瘀、补肾、降脂等作用。该制剂为丹参、五味子、板蓝根等多味中药经提取制成的浸膏片，在我院临床应用多年，疗效确切。为了保证制剂质量，笔者试用TCL法作为该制剂的质量控制方法，现报道如下：
1 仪器与药物
CS-930型薄层扫描仪(日本岛津)；硅胶G及GF254板(青岛海洋化工厂)；微量定量点样管(美国)；五味子甲素、丹参酮ⅡA、靛玉红标准品(购自中国药品生物制品检定所)；新新肝康片(兰州军区总医院自制)；试剂均为分析纯。
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2 定性鉴别
2.1 对照品溶液的制备
精密称取五味子甲素5.10mg、丹参酮ⅡA10.40mg、靛玉红5.31mg，置5ml容量瓶中，以氯仿溶解并稀释至刻度，浓度分别为1.02mg/ml、2.08mg/ml、1.06mg/ml，分别制备五味子、丹参、板蓝根药材对照溶液。
2.2 供试品溶液的制备
样品研细，过60目筛，精密称取10g，加氯仿50ml，加热回流40min，过滤，浓缩至10ml，分别制备未加五味子、丹参、板蓝根药材的阴性对照样品溶液，制法同样品制备。
2.3 层析条件及结果
五味子药材、五味子甲素、样品、未加五味子的阴性对照样品溶液分别点样于硅胶GF254板(10×20cm)，以石油醚∶乙酸乙酯∶甲酸(15∶5∶1)展开，取出，晾干。在254nm紫外灯下观察，供试品色谱中在与五味子甲素色谱相应的位置上有相同的荧光斑点，而阴性对照样品溶液中无相应斑点，见图1。
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图1 五味子甲素的薄层色谱图
板蓝根药材、靛玉红、样品、未加板蓝根的阴性对照样品溶液分别点样，层析条件同五味子。在自然光下，供试品色谱中在与靛玉红色谱相应的位置上有相同的红色斑点，而阴性对照样品溶液中无相应斑点，见图2。
图2 靛玉红的薄层色谱图
丹参药材、丹参酮ⅡA、样品、未加丹参的阴性对照样品溶液分别点样于硅胶G板(10×20cm)，以苯∶乙酸乙酯(19∶1)展开[3]，取出，晾干。自然光下供试品色谱中在与丹参酮ⅡA色谱相应的位置上有相同的红色斑点，而阴性对照样品溶液中无相应斑点，见图3。
图3 丹参酮ⅡA的薄层色谱图
3 样品中五味子甲素和丹素酮ⅡA的含量测定
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3.1 扫描波长及有关仪器参数的确定
五味子甲素：测定波长260nm，参比波长350nm，反射法直线扫描[4]。
丹参酮ⅡA：测定波长275nm，参比波长350nm，反射法矩齿扫描[5]。
3.2 线性范围试验
五味子甲素：用定量毛细管准确吸取对照液1、2、3、4、5μl点于同一硅胶GF254板上，按五味子甲素层析条件展开并进行扫描测定。结果对照品在1μg～5μg内与积分值呈直线关系，γ=0.9 995，回归方程：Y=1 072.9X+477.5。
丹参酮ⅡA：用定量毛细管准确吸取对照液1、2、3、4、5μl点于同一硅胶G板上，按丹参酮ⅡA层板条件展开并进行扫描测定。结果对照品在2μg～10μg内与积分值呈直线关系，γ=0.9 994，回归方程：Y=2 504.5X—214.7。
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3.3 稳定性实验
准确吸取五味子甲素、丹参酮ⅡA对照液各3μl(n=5)，分别点于薄层板上，展开后按0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0h分别进行薄层扫描测定，斑点面积积分值在3h内稳定，结果见表1。
表1 稳定性试验 时间(h)
0
0.5
1
1.5
2
3
RSD(%)
, 百拇医药 五味子甲素
1
3894
3931
3968
3988
3971
3921
0.91
2
3828
3837
3877
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3941
3903
3962
1.40
3
3934
3892
3872
3833
3876
3871
0.85
4
, 百拇医药
3966
4012
4083
3981
3984
3927
1.39
5
3862
3823
3798
3771
3833
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3853
0.89
丹参酮ⅡA
1
7372
7222
7260
7321
7194
7099
1.33
2
7337
, 百拇医药
7292
7312
7192
7173
7153
1.10
3
7202
7228
7135
7076
7098
7195
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0.86
4
7347
7239
7189
7270
7268
7284
0.72
5
7323
7301
7264
, 百拇医药
7189
7138
7165
1.06
3.4 精密度试验
准确吸取五味子甲素对照液3μl、丹参酮ⅡA对照液4μl，分别点于薄层板上，展开后进行薄层扫描测定。峰面积积分值变异系数，五味子甲素RSD=1.14%(n=5)，丹参酮ⅡARSD=0.42%(n=5)。
3.5 样品测定
五味子甲素：取样品细粉约10g，精密称定，按供试品溶液的制备方法配制，准确吸取样品溶液6μl，点于硅胶GF254板上，同标准曲线操作测定含量，结果见表2。表2 含量测定 批号
, 百拇医药
五味子甲素(mg/g)
丹参酮ⅡA(mg/g)
980211
0.611
0.376
980527
0.592
0.373
980806
0.602
0.379
990118
, 百拇医药
0.595
0.380
990421
0.609
0.371
平均值
(0.602±1.39)%
(0.376±1.02)%
丹参酮ⅡA：准确吸取上述样品溶液20μl，点于硅胶G板上，同标准曲线操作测定含量，结果见表2。
3.6 重复性试验
取批号为990421样品，一式5份，按样品测定方法测定五味子甲素和丹参酮ⅡA的含量，结果平均含量分别为0.609mg/g、0.371mg/g，RSD分别为1.21%、1.13%。
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3.7 回收率试验
采用加样回收实验，准确吸取已知含量的供试品溶液适量，分别加入定量的五味子甲素、丹参酮ⅡA对照品溶液，按样品含量测定方法测定，计算回收率，结果见表3。表3 回收率试验(n=6) 编号
五味子甲素
丹参酮ⅡA
加入量(μg)
实测量(μg)
回收率(%)
加入量(μg)
实测量(μg)
回收率(%)
, 百拇医药
1
2.04
1.99
97.55
2.08
2.04
98.09
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2.04
1.96
96.08
2.08
2.02
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97.11
3
3.06
2.92
95.42
4.16
4.06
97.60
4
3.06
3.02
98.69
4.16
, 百拇医药
3.98
95.67
5
3.06
2.96
96.73
4.16
3.95
94.95
平均值
(96.89±1.32)%
(96.68±1.37)%
4 讨论
, 百拇医药
新新肝康片药味较多，经多次试验，表明本文的展开系统分离度好，其它组分无干扰。
在提取样品过程中，笔者曾选用超声波处理、索氏提取器提取和回流提取3种方法进行比较。超声波处理所测得的含量低，索氏提取器由于本品含量少、取样量大，提取效果也不好，所以回流提取属优选。笔者同时还比较了氯仿、乙醇、70%乙醇、甲醇4种溶剂对样品的提取率，发现氯仿提取效果最好，提取样品分离更容易。
本实验根据五味子甲素与丹参酮ⅡA薄层层析斑点的特性，采用双波长薄层锯齿与线性扫描法分别测定其含量，方法快捷、简便、重现性好，可作为该制剂的质量控制标准。
参考文献：
1.谢景文，葛 欣，何晓英，等.新新肝康片对四氯化碳、D-氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤的研究[J].中国药房，1996，5：204.
, http://www.100md.com
2.谢景文，葛 欣，何晓英，等.新新肝康片在动物体内的活血实验[J].中国药房，1999，4：156.
3.中华人民共和国卫生部药典委员会.中国药典(一部) [S].1995年 版.广州：广东科技出版社、化学工业出版社，1995：862.
4.李慧英，赵余庆，徐 晶，等.五味子口服液质量标准研究
[J].中成药，1994，10：15.
5.刘建民.薄层扫描法测定健脑益智冲剂中丹参酮ⅡA的 含量[J].中国中药杂志，1995，2：101.
(收稿日期：1999-12-01 修回日期：2000-02-28), 百拇医药