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编号:13552198
长期雾化吸入4种非雾化剂型药物对健康SD大鼠肺组织的影响(3)
http://www.100md.com 2019年5月1日 《中国药房》 20199
     2.4 支气管肺泡灌洗液中的白细胞计数

    采血后过量麻醉处死大鼠,打开胸腔后留取左肺组织,剥离右肺。用磷酸盐缓冲液(PBS)灌洗右肺3次,每次3 mL,使支气管肺泡灌洗液(BALF)的回收率>80%,然后以1 000 r/min离心10 min,弃上清得到沉淀细胞。用50 μL的PBS重悬细胞沉淀,取出10 μL的重悬液加入90 μL Tris-氯化铵红细胞裂解液(Tris-NHCl4)裂解红细胞1~2 min后,取裂解后溶液10 μL进行白细胞计数。

    2.5 肺組织病理学观察及尘细胞计数

    取大鼠左肺组织,置于10%中性福尔马林中固定24 h,常规梯度乙醇(100%乙醇、95%乙醇、80%乙醇)脱水,自来水冲洗;苏木精染色5~10 min,自来水冲洗;在0.5%盐酸-乙醇溶液中分化1~2 s,温水浸泡冲洗;置于伊红染液中染色30 s,自来水冲洗;分别在95%乙醇、95%乙醇、100%乙醇、100%乙醇中依次脱水,透明,切片烘干,封片,置于显微镜下观察肺组织病理学变化,从每组中取1张片,通过观察10个不同高倍(×400)视野下的尘细胞并对其进行计数,最后求平均值 ......
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