二甲双胍对胰腺癌BxPC-3细胞恶性表型的影响(2)
1.3 细胞人胰腺癌BxPC-3细胞由中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心提供。
2 方法
2.1 细胞培养
将BxPC-3细胞接种至含10%胎牛血清的RPMI1640完全培养液(以下简称“完全培养基”)中,置于37℃、5%C02培养箱(下同)中进行常规培养。
2.2 细胞增殖情况考察
采用CCK-8法检测。取对数生长期BxPC-3细胞,用PBS清洗2次,加入胰蛋白酶-EDTA消化液消化3min,加入RPMI 1640完全培养液(以下简称“普通培养基”)适量,混匀,吹打,以1 000 r/min离心5 min;弃去上清液,加入普通培养基重悬,制成密度为IX105个/mL的单细胞悬液,按每孔100 μL(即IX104个/孔)接种至96孔板中,培养;待细胞生长融合至60%时,将其随机分为对照组和二甲双胍组(5、10、20 mmol/L,剂量设置参考文献[13]) ......
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