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1对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的预防作用及机制研究> 人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注(3)
http://www.100md.com 2020年6月1日 《中国药房》 202011
1对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的预防作用及机制研究'> 人参皂苷Rg1对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的预防作用及机制研究
     2.5 大鼠血清中IL-1β、IL-6含量检测

    采用ELISA法检测。每组随机取3只大鼠,10%水合氯醛麻醉后,将其于仰卧位行心脏取血(取血后放回用于后续实验),血样以1 500 r/min离心20~30 min,取上清液,于-20 ℃保存,备测。按照ELISA试剂盒说明书方法操作,检测血清中IL-1β、IL-6含量。

    2.6 大鼠脑组织中p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达情况检测

    2.6.1 采用免疫组织化学法检测 每组随机取3只大鼠,10%水合氯醛麻醉后,通过心脏经4%多聚甲醛-戊二醛混合液灌流固定,断头取脑组织,以蔗糖沉糖后行10 μm冰冻切片。切片采用牛血清白蛋白封闭1 h,滴加p-p38 MAPK(稀释比例为1 ∶ 100)、p-NF-κB p65(稀释比例为1 ∶ 200)一抗工作液,于4 ℃孵育过夜;次日取出,恢复至室温后,以磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗3次,每次5 min;滴加二抗工作液(稀释比例为1 ∶ 200),于37 ℃下孵育30 min,PBS漂洗3次,每次5 min;加入DAPI染色剂复染细胞核,在 37 ℃下孵育5 min后 ......
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