2.3 苦参碱对细胞培养液中Hyp含量的影响考察

    采用酶消化法检测。取细胞悬液，按1×104 个/孔的密度接种于96孔板中。将细胞分为空白对照组、模型组、阳性对照组(2.5 μmol/L秋水仙碱)和苦参碱中、高浓度组(60、120 μmol/L)，每组设置3个复孔。按“2.2”项下方法进行细胞活化、给药和培养后，吸取上清液，以3 000 r/min离心10 min，取上清，按照Hyp试剂盒说明书操作，检测细胞培养液中Hyp的含量。试验重复10次。

    2.4 苦参碱对细胞培养液中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量的影响考察

    采用ELISA法检测。按“2.3”项下方法分组，每组设置3个复孔，按“2.2”项下方法进行细胞活化、给药和培养后，吸取上清液，以3 000 r/min离心10 min，取上清，按照Col-Ⅰ和COL-Ⅲ ELISA检测试剂盒说明书操作，检测细胞培养液中Col-Ⅰ和Col-Ⅲ的含量。试验重复6次。

    2.5 苦参碱对细胞中α-SMA、TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ、Smad3、Smad4和Smad7 mRNA表达的影响考察

    采用RT-PCR法检测 ......