2.3 指标检测

    2.3.1 症状和体征观察 在实验过程中，观察并记录小鼠的体质量、症状和体征情况。实验结束前1天，根据中医基础理论结合肾阳虚表现的“形、迟、淡、寒”证候对各组小鼠的肾阳虚症状和体征进行评分[10]，评出每组小鼠中各症状和体征级别对应的小鼠只数。各级症状和体征表现：与空白组体征相似，为一级;仅表现出自主活动减少、嗜睡，为二级;反应迟钝、精神萎靡，体毛稀疏，毛(爪、尾)少光泽，为三级;蜷缩拱背，畏寒肢冷，毛发易脱落，毛(爪、尾)无光泽，为四级。

    2.3.2 脏器指数、生化指标检测 取材前，小鼠禁食不禁水12 h。末次给药1 h后，称定小鼠体质量，摘眼球取血后，取出肾、睾丸，精密称质量，并计算小鼠的脏器(肾、睾丸)指数[脏器指数=脏器质量(mg)/体质量(g)]。血样在室温下静置5 h，然后以3 000 r/min离心10 min，分离血清，再按照相应试剂盒说明书操作，测定血清中睾酮、皮质醇、尿素氮、肌酐水平。

    2.3.3 肾组织病理学变化观察 取小鼠右肾，置于4%甲醛溶液中固定，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，常规石蜡包埋、切片(厚度约3 ?m)，行苏木精-伊红(HE)染色后 ......