2.5 人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞培养液中IL-4、IL-6和TNF-α水平的影响考察

    采用ELISA法进行测定。将小鼠脾淋巴细胞按1×105个/孔接种至96孔板中，按“2.3”项下方法进行细胞分组、给药。培养48 h后，以3 000 r/min离心10 min，收集各孔细胞培养上清液。参照相应试剂盒说明书方法操作，检测细胞培养液中IL-4、IL-6和TNF-α水平。试验重复3次。

    2.6 人参根提取物对小鼠脾淋巴细胞中自噬相关蛋白表达的影响考察

    采用Western blotting法进行测定。将小鼠脾淋巴细胞按5×106个/孔接种至6孔板中，将细胞分为空白对照组和不同质量浓度人参根提取物组(按“2.3”项下方法设置为32、125、500 μg/mL，以冻干粉末计)。培养48 h后，以1 000 r/min离心5 min，收集各孔细胞，用PBS洗涤3次，然后加入细胞裂解液充分裂解后，再采用BCA法测定蛋白浓度。将蛋白变性处理后，取50 μg在80 V电压下行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳90 min，然后以200 mA湿法转膜80 min至硝酸纤维素膜(NC)上。将膜放入含5%脱脂奶粉的PBST缓冲液中室温封闭1 h后，加入LC3B、Beclin-1、AKT、p-AKT、AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR、β-actin一抗(稀释度均为1 ∶ 1 000) ......