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编号:13174271
延胡索甲素和乙素的人源肠内菌丛生物转化及在人源Caco—2细胞单层模型的吸收转运(3)
http://www.100md.com 2013年1月1日 《中国中药杂志》 2013年第1期
     2.10细胞摄入试验

    2.9项取样全部结束后,小心移走转运孔中的溶液,以冷的HBSS溶液洗涤3次,放置在-20 ℃冰箱中冷冻保存24 h后,室温复融、放置24 h,如此重复冻融3次,将附着细胞的聚碳酯膜取出,置于200 μL 70%甲醇中,涡旋混匀后超声溶解20 min,再在15 000×g条件下离心10 min,取上清液,即得细胞摄入分析样品,待处理后分析测定。

    2.11分析样品处理

    将2.8和2.9项冷冻干燥样品从-20 ℃冰箱中取出,加入甲醇,涡旋混匀后超声溶解20 min,再在15 000×g条件下离心10 min,取上清液,过0.25 μm微孔滤膜,按2.7项HPLC条件进行分析测定。

    2.12表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp)计算和数据处理

    CDL和THP在Caco-2细胞模型中的Papp按下式计算:Papp = dQ/dt×1/A × 1/C0 ......
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