白术四倍体试管苗形态学及AFLP分析(3)
PCR扩增程序:每个循环降低0.7 ℃。1~12个循环扩增条件为95 ℃预变性5 min之后变性35 s,65 ℃复性35 s,72 ℃延伸1 min;13~23个循环扩增参数为94 ℃变性30 s,56 ℃复性30 s,72 ℃延伸1 min。选择性扩增产物用6 %的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳2 h后银染显色。每个样品的扩增无带记为“0”,有带记为“1”, 总条带数指单个基因位点扩增条带的总数,多态性条带为2个材料在同一位点上的差异性条带。
3结果与分析
3.1秋水仙素的诱导
3.1.1白术变异植株的染色体鉴定白术二倍体植株根尖染色体数为2n=2x=24,同源四倍体植株染色体数为2n=4x=48,见图1。
3.1.2同源四倍体白术的诱导诱导结果见表2,用0.05%的秋水仙素溶液处48 h及0.1%的秋水仙素溶液处理36 h的白术幼芽成活率高于47.7% ......
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