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编号:12619585
麦冬多糖MDG—1对膳食诱导肥胖模型小鼠肠道益生菌群多样性影响的研究(3)
http://www.100md.com 2015年2月15日 中国中药杂志 2015年第4期
     2.3应用PCR-DEEG技术分析肠道益生乳酸菌多样性

    用粪便基因组DNA提取试剂盒提取不同处理组小鼠粪便中的总DNA,实验步骤按说明书操作,所得DNA储存于-20 ℃冰箱。将提取出的粪便DNA以及部分传统方法得到的分离DNA做V3区扩增。对所得PCR产物进行DGGE分析,并进行克隆,实验步骤按pGM-T克隆试剂盒说明书操作,克隆产物送上海生工生物工程有限公司测序;克隆测序结果上传到DDBJ数据库,获得相应序列号,并与NCBI数据库进行比对。

    2.4数据处理

    所有数据用±s表示,采用SPSS 19.0软件进行分析。多组间比较采用One-way ANOVA处理,方差齐使用LSD-t法,方差不齐使用Dunnett-T3法,以P<0.05表示差异有统计学意义。

    3结果

    3.1应用传统培养方法分析肠道益生乳酸菌多样性

    3.1.1MRS平板计数通过MRS平板对不同处理组产生的菌群进行计数,稀释梯度为1×10-3,见表1。结果显示,与模型组相比,不同浓度处理的MDG-1给药组中菌群的总数明显升高;同时,随着MDG-1给药浓度的增加,菌群的数量也在持续增加 ......
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