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编号:12863341
半夏曲炮制过程中优势微生物的鉴定(2)
http://www.100md.com 2016年8月15日 《中国中药杂志》2016年第16期
     2.4.2 优势真菌的鉴定 将保存的优势真菌菌株传代培养,刮取菌苔,分别用酵母菌基因组DNA、植物基因组DNA提取试剂盒提取不同发酵时间点的优势酵母菌和霉菌的DNA,采用真菌26S rDNA的通用引物NL1/NL4进行扩增。PCR反应体系:模板DNA 2 μL,上下游引物各1 μL,2×Taq PCR master Mix 2 μL,补充ddH2O至25 μL。反应程序:94 ℃ 1 min;94 ℃ 30 s,54 ℃ 1 min,72 ℃ 2 min,30个循环;72 ℃ 10 min。其他同2.4.1。

    3 结果与分析

    3.1 半夏曲发酵过程中微生物种类、数量变化及优势菌种形态学观察

    在半夏曲炮制过程中,从发酵0 h至发酵72 h,细菌数量少且呈缓慢增长趋势;酵母菌在发酵前期数量偏少且变化不明显,发酵至54 h时数量急剧增加,至发酵结束时达1×107.78 CFU·mL-1,在发酵前期并未出现霉菌,然而发酵至54 h时霉菌数量迅速升高1×106.91 CFU·mL-1,至发酵结束时与酵母菌数量相差无几(表1,图1)。5个不同发酵时间点样品共挑选出27株优势菌,其中细菌11株 ......
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