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编号:13105766
基于分子亲和色谱技术的肉苁蓉低分子糖巨噬细胞激活作用靶点群鉴定与机制分析(3)
http://www.100md.com 2017年10月1日 《中国中药杂志》 2017年第19期
     3.2 肉苁蓉低分子糖对RAW264.7细胞NO释放的影响 NO是一种重要的具有机体免疫调节作用的细胞因子[9],被广泛报道参与调控RAW264.7细胞激活反应。为进一步考察LMSC对RAW264.7细胞的激活作用,测定了LMSC刺激后细胞上清液中NO的含量。巨噬细胞激活阳性药物LPS组NO释放量显著高于空白对照组(P<0.01),与之相似,0.5,1,2 g·L-13种剂量LMSC给药组中RAW264.7细胞NO释放量均明显高于空白对照组(P<0.01),且呈剂量依赖性,见图2。以上结果表明LMSC具有促进RAW264.7细胞释放NO的效果,证实其巨噬细胞激活作用。

    3.3 肉苁蓉低分子糖对RAW264.7细胞活力的影响 细胞毒性作用是制约新药开发与影响药物发挥药效的一项重要因素,为了考察本实验中LMSC所用剂量是否具有潜在的细胞毒性,利用MTT法检测LMSC给药后的RAW264.7细胞活力。LMSC在0.25~2 g·L-1干预RAW264.7细胞24 h后对细胞活力没有显著影响,以上结果提示0.25~2 g·L-1LMSC对RAW264.7没有细胞毒性,见图3。

    3.4 肉蓯蓉低分子糖巨噬细胞激活作用靶点群的富集与鉴定 环氧活化琼脂糖凝胶是一种广泛应用于含有羟基或氨基的糖类、蛋白质等多种分子偶联的固相载体。LMSC主要由富含羟基的果糖、甘露醇等成分组成,本研究利用所含的羟基可与环氧活性基团进行反应的特性 ......
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