建泽泻鲨烯合酶原核表达、功能验证及其免疫检测研究(4)
4 討论鲨烯合酶为三萜生物合成途径中的关键酶，竞争利用 FPP 合成三萜，其含量和活性决定了下游产物的含量，SS基因的过量表达可促进三萜类化合物合成[17，22]。本研究在前期克隆获得AoSS全长的基础上，开展建泽泻鲨烯合酶原核表达、功能验证及其免疫检测研究，为进一步开展AoSS基因功能及其调控机制研究奠定基础。
构建原核表达载体，将目的蛋白在大肠杆菌内高效表达。但由于原核生物缺乏蛋白质翻译后加工修饰的过程，使蛋白无法折叠或形成正确的二硫键，常以包涵体的形式存在于细胞中[23]。包涵体因立体结构存在错误，没有生物活性，包涵体的复性是获取有活性蛋白的关键步骤，包涵体的复性条件对其构象和活性有着重要的影响[24]。因此，本研究将充分洗涤的包涵体溶解于8 mol·L-1的尿素 ......
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