1.1.4 仪器：光学显微镜由美国Nikon Corporation公司提供;HM550切片机由德国Microm公司提供。

    1.2 实验方法

    1.2.1 软骨细胞培养：对残耳进行清洗消毒，剪碎至1mm3大小的颗粒，加入0.25%胰酶5ml，在37℃恒温水浴箱中振荡消化20min，弃去上清液，加入0.4%胶原蛋白酶5ml，37℃消化300min，过筛收集软骨细胞。将收集的耳软骨细胞加入10%胎牛血清培养基中，按3×10-8/L的细胞浓度接种，置于37℃恒温水浴箱中进行传代培养，收集第二代残耳软骨细胞接种于支架上。

    1.2.2 细胞-支架復合物的体外及体内培养：将二代残耳软骨细胞接种在圆盘状聚氨酯支架上，随机分为3组(A、B、C)，A组于接种后24h行扫描电镜观察;B组于体外培养3周后行扫描电镜观察;C组于体外培养1周后植入裸鼠体内，6周后再行扫描电镜观察。

    1.2.3 实验检测： A、B、C三组软骨组织培养结束后于扫描电镜下观察软骨细胞支架结构及弹力纤维形成情况，采用10%中性福尔马林固定软骨组织24h，经石蜡包埋、脱水，制成4～5μm厚切片，依次行HE染色、番红O染色、弹力纤维染色，观察组织情况。

    2 结果

    2.1 软骨细胞与材料的粘附情况：软骨细胞接种24h后，扫描电镜下可观察到圆盘状聚氨酯支架上细胞形态均匀、排列有序、接触良好 ......