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编号:13620852
纳米材料体外细胞毒性研究现状与展望(3)
http://www.100md.com 2017年1月15日 《世界中医药》 20172
     免疫印记法与CDDE(Cell Death Detection ELISA)法,吖啶橙/溴乙非啶(Acridine Orange/ethidium Bromide)[24]试验及FITC-Annexin V/PI[25]双荧光标记也可用于细胞毒性检测,上述方法可用于区别细胞凋亡与细胞坏死。Radziun等[16]采用Annexin V-FITC/PI双荧光标记,流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡,流式细胞散点示意图左下角为正常细胞百分含量,右下角为早期凋亡细胞百分含量,右上角为晚期凋亡细胞百分含量,以及左上角为坏死细胞百分含量。

    3.4 细胞生长抑制检测方法

    细胞生长抑制实验的方法包括MTT,XTT,WST-1/WST-8,MTS,TTC,Alamar Blue,[3H]胸腺嘧啶掺入法,Brude掺入法及细胞计数法等多种细胞增殖毒性研究方法。MTT,XTT,WST-1/WST-8,MTS,TTC等属于四氮唑盐类物质,可以被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原成有色甲瓒,然后通过酶标仪记录吸光度OD值,继而检测细胞毒性的大小。MTT比色法是目前纳米材料细胞毒性分析最常用、最经典的方法,MTT在溶液中呈浅黄色,可以被线粒体内的琥珀酸脱氢酶还原生成难溶性的深紫色结晶甲瓒(formazan),并沉淀在细胞中(死细胞无此功能),在特定溶剂中完全溶解,通过酶标仪在570 nm波长附近测定光吸收值 ......
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