4.1 色谱条件优化 冬虫夏草水提液中存在大量大极性成分，在反向色谱模式下需要用100%水溶液做流动相才可有效分离，但常规反向色谱柱在纯水流动相条件下会造成色谱柱损坏，无法完成大极性成分分离工作。根据本观察组前期结果显示Agilent ZORBAX SB-AQ色谱柱在纯水条件下可以有效分析冬虫夏草中的大极性化合物，因此本实验选用了该款色谱柱作为分析柱[20]；流动相系统比较了水-乙腈系统和0.1%甲酸水溶液-乙腈系统，结果显示流动相中添加甲酸，有利于色谱峰的分离；同时也比较了不同柱温(25 ℃和35 ℃)对色谱分离的影响，结果两者无明显区别，本文选择了室温25 ℃作为实验条件；检测波长主要参照前期冬虫夏草水溶性指纹图谱文献报道，选择了260 nm作为检测波长。

    冬虫夏草醇提液中醇溶性成分较多，本实验通过初步试验发现采用Waters X-bridge色谱柱及水-乙腈流动相系统即可对供试品成分进行较好的分离。通过比较柱温25 ℃和35 ℃，结果显示35 ℃时色谱分离较好 ......