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编号:13546081
电针对神经根型颈椎病大鼠PI3K/AKT信号通路的影响(3)
http://www.100md.com 2019年6月15日 《世界中医药》 201912
     1.2.3.2 外周神经模型感觉功能的检测 采用YLS-3E型痛分析仪检测大鼠外周神经模型感觉功能,在大鼠清醒状态下测量机械性痛阈,首先将YLS-3E型痛分析仪上一个钝头有机玻璃圆锥体此安装固定于大鼠足趾第3、4跖骨间,通过线性逐渐增大压力,直到大鼠嘶叫挣扎为止,此时仪器自动记录下的大鼠最后试图抽回后爪压力值(g)即为大鼠的机械痛阈,以此评估大鼠外周神经模型感觉功能。

    1.2.3.3 蛋白质印迹法检测PI3K/AKT通路表达动物于造模电针干预14 d后,通过用10%水合氯醛过量麻醉致死,然后在4 ℃下将造模是C6-T2段压尼龙鱼线处脊髓及神经根剥离出来,并以用研磨器制成组织匀浆,在蛋白裂解液的作用下,充分提取蛋白后,在低温离心机上高速离心(12 000 r/min),取上清液,-20 ℃冰箱保留代用。然后以考马斯亮蓝法测定样品蛋白浓度,计算同等体积下,每组样品的蛋白上样量。取出所购买的SDS-PAGE琼脂糖凝胶,加入电泳液并没过短玻板,轻轻提取加样孔梳,在第一加样孔用移液器精密加入5 μL蛋白MARKER对蛋白分子量进行标记 ......
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