市售鹿鞭的DNA指纹鉴定研究(2)
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在实验操作中，我们应从反应的模板DNA浓度、反应体系中dNTP浓度、Mg2+浓度、Taq酶用量以及引物的选择这几方面进行反复摸索，找到反应的最佳条件，使反应后的扩增产物具有高度重复性。在进行鉴定前，应将药材进行彻底清洗后紫外照射30min，避免结果失真。
鉴定市售鹿鞭所用的特异性引物，是选择了正品鹿鞭和牛鞭有显著差异的一段Cyb基因序列，而正品鹿鞭和牛鞭的基因序列均来自GenBank中正品鹿鞭和牛鞭的基因序列，此引物在新鲜品鹿鞭与牛鞭鉴定中曾使用，新鲜品鹿鞭扩增出306bp基因片段，而牛鞭未扩增出相同的基因片段[4-6]。本实验采用此鹿鞭特异性引物对市售鹿鞭进行的DNA指纹鉴定，与新鲜品鹿鞭和牛鞭鉴定结果一致，和吉林省吉林市食品药品检验所的鉴定结果相符。该结果表明：本课题组设计的特异性鉴别引物，可以用于市售鹿鞭与伪品的鉴别。从研究的结果来看，将分子生物学技术引入到动物类药材的鉴定中是可行的，说明用以上技术鉴定动物类药材的有效性和可靠性[7-8]。
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(收稿日期：2013-10-12)
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